在細胞培養(yǎng)實驗中,對于細節(jié)的把控至關重要,任何的疏忽都有可能對結果產(chǎn)生影響,尤其是在使用細胞工廠這樣的多層培養(yǎng)容器時。今天我們就來講講,細胞工廠在培養(yǎng)時需要注意的小細節(jié)。
細胞培養(yǎng)注意事項
1、所有操作必須嚴格按照無菌操作的要求進行。
2、提前預熱∶培養(yǎng)容器越大,要達到設定的培養(yǎng)溫度越長,所以在實驗開始前,將細胞工廠和培養(yǎng)基預熱至培養(yǎng)溫度,可加快細胞貼壁,并顯著提高細胞回收率。
3、請緩慢操作,避免大幅晃動產(chǎn)生氣泡。氣泡可能導致培養(yǎng)基從上層流到下層,導致培養(yǎng)基分配不均勻。
4、避免酒精或消毒液噴灑到透氣蓋上,酒精或消毒液可能會濕潤疏水濾膜,導致不能透氣影響氣體交換或?qū)е虏僮鲿r不能平衡壓力。
細胞工廠收獲時注意事項
1、棄去培養(yǎng)液后使用無鈣無鎂磷酸鹽緩沖液(CMF-PBS)清洗細胞工廠(40~50 mL/層),若有需要重復清洗一次,確保將殘留的培養(yǎng)液清洗干凈。
2、加入消化液平均分布到每層(10~40 mL/層),輕輕前后左右傾斜細胞工廠,確保消化液完全浸過培養(yǎng)面,細胞出現(xiàn)間隙時,棄去消化液,輕輕拍擊細胞工廠幫助細胞從生長面脫離。
3、細胞工廠采用多層結構設計,由于不能清晰觀察中間層的細胞消化狀態(tài),建議參照完全相同培養(yǎng)條件下的培養(yǎng)瓶或單層細胞工廠的消化狀態(tài),或使用專用的多層細胞培養(yǎng)器觀察臺來觀察每層細胞的生長狀態(tài)。
4、若細胞懸液收集完成后細胞工廠培養(yǎng)層存在大量細胞,則需要清洗多次或調(diào)整細胞消化的操作。
5、培養(yǎng)溫度及CO2濃度的偏差可能影響到細胞的收獲率,需密切關注培養(yǎng)過程中的溫度和CO2濃度設定值是否滿足需求。
這就是富道細胞跟大家分享的細胞工廠培養(yǎng)細胞時的注意事項,注意以上這些小細節(jié)讓你的細胞培養(yǎng)實驗事半功倍富道專注高端生物耗材的研發(fā)、生產(chǎn)與銷售。
上一篇: 細胞工廠在疫苗方面的應用
下一篇: 平整度對細胞工廠的影響