我們在使用細(xì)胞搖瓶、高效搖瓶多用于培養(yǎng)懸浮細(xì)胞,由于懸浮細(xì)胞大多胞體呈圓形,不貼于支持物上,呈懸浮生長,容易大量繁殖,且相對于貼壁細(xì)胞少了消化這一步驟,但是我們會常遇到細(xì)胞聚團、細(xì)胞生長慢或不生長、細(xì)胞發(fā)生貼壁這三種情況。
當(dāng)我們在使用細(xì)胞搖瓶培養(yǎng)細(xì)胞時遇到細(xì)胞聚團時,我們需要知道的是少量細(xì)胞聚團、呈葡萄串狀,屬于正?,F(xiàn)象,特別是細(xì)胞密度較低時,易出現(xiàn)這種情況。通過靜養(yǎng)(少操作,少觀察) 、補加血清(5%)等方式,讓細(xì)胞密度增高逐漸適應(yīng)環(huán)境后可以恢復(fù)正常。還有我們需要知道的時血清的批間差也會導(dǎo)致這種情況,也可以選擇換一種血清。
而我們在使用細(xì)胞搖瓶來培養(yǎng)細(xì)胞時遇到細(xì)胞生長慢或者不生長的情況時也不要慌,懸浮細(xì)胞有密度依賴性,在高密度下狀態(tài)比較好,低密度時狀態(tài)較差,所以傳代比例要控制,細(xì)胞狀態(tài)不好時,傳代可以不用離心法,而是補液或者半換液的方式,以避免離心損失細(xì)胞。
而我們在使用細(xì)胞搖瓶培養(yǎng)時發(fā)現(xiàn)搖瓶內(nèi)細(xì)胞發(fā)生了貼壁,這可能是因為細(xì)胞培養(yǎng)瓶靜置時間太長,細(xì)胞沉底后會出現(xiàn)少量貼壁現(xiàn)象,但這種貼壁非常松,吹一下或拍一下細(xì)胞就可以起來;此現(xiàn)象為正?,F(xiàn)象,無需特殊處理。