細(xì)胞工廠是一種多層結(jié)構(gòu)的細(xì)胞培養(yǎng)容器,常見的規(guī)格有1層、2層、5層、10層、40層,主要用于貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。這種裝置培養(yǎng)細(xì)胞的操作流程如下:
1.檢查細(xì)胞工廠是否干凈,有無破損,有無懸浮物等。
2.用傾倒的方式加入需要量的細(xì)胞懸液到細(xì)胞工廠中,建議每層加入的體積為200ML。
3.加完細(xì)胞懸液后保持側(cè)立,有加液口的一側(cè)背向自己,平衡一段時(shí)間以使液體平均分配到各層。
4.逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)90度,使加液口一面朝上,靜置一段時(shí)間,培養(yǎng)液便會(huì)自動(dòng)平均分配到每一層中。
5.雙手握住進(jìn)液口的一面,慢慢將細(xì)胞工廠放倒,變?yōu)樗椒胖谩?/p>
6.采用十字交叉法混合懸液,然后輕輕地將細(xì)胞工廠移至細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育培養(yǎng)。
7.培養(yǎng)結(jié)束后直接將培養(yǎng)液倒入收集容器。
8.用PBS清洗一遍,加入細(xì)胞消化液,重復(fù)步驟2-4,靜置2分鐘。
9.加入適量消化終止液混勻,把細(xì)胞懸液倒入收集容器。
細(xì)胞工廠培養(yǎng)細(xì)胞的操作流程基本是一致的,但具體操作步驟可能會(huì)因細(xì)胞類型、實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡纫蛩囟兴煌2僮鞯臅r(shí)候要遵循無菌原則,避免操作不當(dāng)損傷細(xì)胞,影響后期實(shí)驗(yàn)效果。